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    elisa試劑盒的兩大洗滌方法是怎樣的呢?

    發(fā)布時(shí)間: 2021-11-17  點(diǎn)擊次數: 1315次
     
      elisa試劑盒是一種敏感性高、特異性強、重復性好的elisa試劑盒,其試劑安穩、易保留、操作簡(jiǎn)練、作用區分客觀(guān)等要素,適宜于大規模篩查實(shí)驗又能夠用于少數標本的檢查,能夠做定性實(shí)驗也能夠做定量分析。
      試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
      elisa試劑盒洗滌的兩大方法:
      一、浸泡式
      1.吸干或甩干孔內反應液;
      2.用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿(mǎn)板孔后,即甩去);
      3.浸泡,即將洗滌液注滿(mǎn)板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動(dòng),浸泡時(shí)間不可隨意縮短;
      4.吸干孔內液體。吸干應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
      5.重復操作c和d,洗滌3-4次(或按說(shuō)明規定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數或延長(cháng)浸泡時(shí)間。
      二、流水沖洗式
      初用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來(lái)水。洗滌時(shí)附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗,持續沖洗2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡(jiǎn)便、快速。已有實(shí)驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時(shí)設法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
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